TIPIFICACION DE GRUPOS SANGUINEOS ABO DIRECTO E INVERSO

FORMA DIRECTA

OBJETIVO:

Al finalizar la practica el alumno domine la técnica para la realización de la prueba para determinar grupos sanguíneos y Rh, empleando la técnica directa (con sangre total) utilizando los antisueros correspondientes para la determinación en el sistema ABO.

INTRODUCCIÓN:

Principio: en la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos. Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhiere carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo cero “0” se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosalina.

Sobre esta cadena puede adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es de glucosalina se tiene del grupo A y si es de galactosa se tiene el grupo B. si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo AB.

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos mas.

El sistema Rh es independiente del sistema ABO, pero igual de importante en la tipificación sanguínea.

Hay antígenos presentes en los eritrocitos de casi las personas y se les llama universales, otros antígenos se han concentrado en una sola familia y se les llama familiares y se han encontrado algunos otros que pertenecen solamente a un individuo y se les llama personales.

La importancia de la determinación de los grupos sanguíneos y Rh en el laboratorio es en las transfusiones sanguíneas y en la eritroblastosis fetal.

 

MATERIALES:

Pipeta pasteur

6 tubos de ensaye

Gradilla

Centrifuga

SUSTANCIAS:

Suero Anti-A

Suero Anti-B

Suero Anti-D

Solución isotónica al NaCl al 0.9%

PROCEDIMIENTO:

Método de tubo de ensaye:

1.     Previa asepsia, practicar venopuncion y recoger 1 ml de sangre

2.    Depositar en tubo se ensaye, 19 gotas de solución salina y una gota de eritrocitos para formar la suspensión de eritrocitos al 5 %.

3.    Marcar tres tubos con las letras A,B y Rh respectivamente, depositar en el tubo A dos gotas de suero Anti-A, el el tubo B dos gotas de Anti-B y en el tubo Rh dos gotas de suero y Anti-D.

4.    Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 5% (preparada con anterioridad).

5.    Centrifugar a 1000 r.p.m. durante dos minutos

6.    Sacar los tubos y observar inmediatamente la presencia de aglutinación.

RESULTADOS:

Método de tubo de ensaye:

ü  Si existe aglutinación en el tubo “A” la sangre es de tipo “A”.

ü  Si existe aglutinación en el tubo “B” la sangre es de tipo “B”.

ü  Si existe aglutinación en los tubos “A” y “B” la sangre es de tipo “AB”.

ü  Si no existe aglutinación en los tubos “A” y “B” la sangre es de tipo “O”.

ü   Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será de factor Rh positivo.

ü  Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será de factor Rh negativo.

RESULTADOS DE LAS MUESTRAS OBTENIDAS

Muestra: 1	Muestra: 2
Grupo: “A” Rh: Positivo	Grupo: B Rh: Positivo

 
INVERSO

OBJETIVO. Al término de la práctica el alumno estará capacitado para comprobar indudablemente la tipificación sanguínea.

INTRODUCCIÓN. El suero del paciente que contiene anticuerpos en contacto con los eritrocitos que contienen antígenos formando un complejo AG-AC, que se manifiesta microscópicamente mediante una aglutinación.

MATERIAL.

1.     Pipetas pasteur.

2.    4 tubos de ensayo.

3.    Gradilla

4.    Centrifuga

SUSTANCIAS.

·         Eritrocitos lavados AYB conocidos.

·         Suero del paciente

PROCEDIMIENTO

PRUEBA A LA INVERSA.

1.     Se preparan suspensiones de glóbulos rojos al 25 de la siguiente forma, en un tubo de ensaye marcado con la letra A se pone una gota de sangre A y en otro marcado con la letra B s pone una gota de sangre B, se llenan los tubos con solución salina se centrifuga a 3400 R.P.M. durante 3 minutos y se decanta el líquido sobrenadante invirtiendo los tubos.

2.    A cada uno de los tubos se añade 1 cm de solución salina y se suspenden los glóbulos rojos.

3.    Se marcan dos tubos de ensaye, con la letra A y el segundo con la letra B, añadiendo dos gotas de suero.

4.    Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2% (Preparada con anterioridad) previamente mezclada, al tubo A suspensión “A” y al tubo B suspensión “B”

5.    Centrifugar a 1000 RPM durante dos minutos.

6.    Sacar los tubos mezclando suavemente e interpretar resultados.

 

RESULTADO

PRUEBA INVERSA.

-          Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos A significa que tiene Ac´s B, el suero que tiene Ag-A corresponde a la sangre B, el suero problema corresponde a una sangre de grupo B.

-          Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos B significa que tiene Ac´s, el suero que tiene Ag-B corresponde a la sangre A, el suero problema corresponde a una sangre de grupo A.

-          Si el suero problema aglutina los glóbulos rojos A y B significa que tiene Ac´Sab, el suero que tiene Ac´s AB corresponde a la sangre O, en consecuencia el suero problema corresponde a una sangre del grupo O.

-          Si el suero problema no aglutina en los glóbulos rojos A y B significa que no tiene ac´s ni A ni B, por lo que tanto el suero problema pertenece a una sangre del grupo AB.

RESULTADOS.

-          Teresa De Jesús Reyes Martínez. SANGRE TIPO “B”.

-          Nallely Avilés Blancarte SANGRE TIPO “A”.

 

CONCLUSION. ESTA ES OTRA MANERA DE PODER HACER LA TIPIFICACION DEL GRUPO SANGUNEO ABO :) ES UN POCO MAS LABORIOSA PERO ES MUY PADRE