V D R L

V.D.R.L.

Antígeno de cardiolipina para investigar reaginas de la sífilis en suero sin inactivar, en Plasma y L.C.R. (no requiere reconstitución)

AGENTE DE DIAGNOSTICO

INTRODUCCIÓN

La sífilis es una enfermedad generalizada, producida por Treponema pallidum, trasmitida  habitualmente por contacto sexual.                                                                                                               El diagnostico descansa en la serología; los métodos determinan dos clases de anticuerpos:

1) Tipo “cardiolipina”, no treponema e inespecíficos y

2) Los antitreponemas específicos.

La facilidad para su determinación ha hecho que los de tipo cardiolipina se utilicen universalmente en las exploraciones iniciales ya sean exámenes individuales o encuestas de población; la variante técnica más comúnmente empleada es la llamada VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) que determina la floculación en placa (cuantitativa) del antígeno con cardiolipina y lecitina.

REACTIVOS Y MATERIAL PROPORCIONADO.                                                                                                           

-Antígeno en suspensión estabilizado (VDRL)                                                                                                          

-Control   Positivo                                                                                                                                                          -Control Negativo                                                                                                  

-Aguja No.21 sin bisel                                                                                                                                       -Pipetas desechables (únicamente para presentaciones de 100 pruebas)                                                          

Estabilidad y almacenamiento del reactivo                                                                                                          El antígeno de VDRL y los Sueros Controles son estables hasta su fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando se almacena de 2 a 8°C. No congelar.

MATERIAL Y EQUIPO NECESARIO NO PROPORCIONADO                                                                                                            -Placa cóncava (Indispensable)                                                                                                                            -Agitador mecánico                                                                                                                                                       -Cronometro                                                                                                                                                                          -Microscópico                        

Obtención de la muestra

1.    Obtener 3.0 ml. De sangre por punción venosa.

2.    Centrifugar y sacar el suero.

 

MÉTODO CUALITATIVO:

1.    Es un anillo de una placa cóncava deposite 0.05 ml. de suero problema.

 

2.    En anillos diferentes colocaron una gota de control positivo y en otra por separado una gota de control negativo, der sobre la superficie del anillo.

 

3.    Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado previamente re suspendido, en cada una de las muestras utilizando la ajuga No. 21 sin bisel.

4.    Colocar la placa sobre un agitadormecánico a 180 rpm DURANTE 4 MINUTOS. Las pruebas realizadas en un clima extremadamente seco puede provocarla evaporación de las muestras por lo tanto la placa en rotación  puede ser cubierta con una tapa de caja Petri humedecida previamente con una gasa.

 

5.    Leer inmediatamente a microscopio con Objetivo y Ocular 10X.

INTERPRETACIÓN:

Control Positivo

Presencia de floculación mediana o grande

Control positivo

Ausencia de floculación.

MÉTODO CUANTITATIVO

1.    Seleccionar los sueños positivos obtenidos en la prueba cualitativa.

2.    Colocar con una gradilla 6 tubos de 12 x 75 mm y numerarlos.

3.    Agregar a cada un 0. 5 ml de solución salina 0.9%.

4.    Depositar 0.5 ml de suero al tubo No. 1 y mezclar.

5.    Pasar 0.5 ml de tubo No. 1 al tubo No. 2  mezclar.

6.    Pasar 0.5 ml de tubo No. 2 al tubo No. 3mezclar.

7.    Continuar esta operación hasta el tubo No. 6.

8.    Depositar 0.05 ml de cada una  de las disoluciones sobre los diferentes anillos de la placa cóncava.

9.    Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado VDRL utilizando la aguja No. 21 sin bisel a cada una de las disoluciones.

10. Colocar la placa sobre un agitadormecánico a 180 rpm durante 4 minutos.

11. Leer el microscopio con objetivo y ocular 10X.

INTERPRETACIÓN

El título del suelo problema será la últimadilución que presente un resultado positivo. Ejemplo:

Si se presenta floculación hasta el tubo No. 3 esta es la disolución 1:8 por lo tanto el titulo será 1:8.

 

Nota

1.    Sueros extremadamente turbios o hemolizados son insatisfactorios para la prueba.

2.    Sueros débiles positivos y con fuertes evidencias clínicas de la enfermedad es conveniente efectuar la prueba cuantitativa, ya que ocasionalmente pueden presentar  el fenómeno de prozona.

3.    Si la lectura del resultado no se  realiza inmediatamente después de los 4 minutos puede secarse la reacción y causar dificultad en la interpretación.

 

4.    El antígeno en suspensión debe de estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.

 

RESULTADOS

 

Muestra 1

Negativo (No hubo aglutinación )

 

 

CONCLUSIÓN

*La práctica es muy fácil de realizar pero es un poco complicado conseguir una muestra positiva ya que como es un problema de infección puede dar problemas de salubridad.

 

 

 

 

 

 

EVIDENCIAS FOTOGRAFICAS