SIGNIFICADO CLINICO.
La hemoglobina es una proteína que contiene
hierro, otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y
es la encargada de transportar el oxígeno por la sangre de los pulmones a los
tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles
normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria,
cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias. Si el nivel de
hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías, deshidratación o estancias en
lugares con altitud. El diagnostica clínico debe realizarse teniendo en cuenta
todos los datos clínicos y de laboratorio.
Material.
·
2 Cubetas para espectrofotómetro.
·
Gradilla.
·
Pipeta.
REACTIVO/MUESTRAS.
·
Cianuro.
·
Sangre con anticoagulante.
·
Reactivo blanco.
Equipo de laboratorio.
·
Espectrofotómetro.
PROCEDIMIENTO.
1.
Condiciones del ensayo:
Longitud de onda…………………..540 nm.
Cubeta…………………………..1 cm de paso.
Temperatura……………………….15-25 Grados C.
2.
Ajustar espectrofotómetro a cero
frente a agua destilada.
3.
Pipetear:
a)
METODO MACRO.
|
Blanco
|
Patrón.
|
Muestra
|
RT (mL)
|
5.0
|
5.0
|
5.0
|
Calibrador (µL)
|
--
|
20
|
--
|
Muestra (µL)
|
--
|
--
|
20
|
b)
METODO MICRO.
|
Blanco
|
Patrón
|
Muestra
|
RT (mL)
|
2.5
|
2.5
|
2.5
|
Calibrador (µL)
|
--
|
10
|
--
|
Muestra (µL)
|
--
|
--
|
|
4.
Mezclar e incubar 3 minutos a
temperatura ambiente (15-25ºC).
5.
Leer la absorbancia (A) del
calibrador y la muestra frente al Blanco del reactivo.
.
Cálculos:
-
Con factor2
(A)Muestrax36.77=g/dL
de hemoglobina en la muestra.
- Con Patrón:
(A) muestra/(A)Patron x15 (conc. del patron) = d/dL de Hb en la muestra.
Resultado=
Muestra numero 1. 15.22 d /dL
Muestra numero 2. 16.5 g/dL
Conclusion con esta practica nos pudimos dar cuenta de los diferentes valores que puede tomar la hemoglobina.
Evidencias de la practica.