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sábado, 11 de abril de 2015

IDENTIDICACION DE CELULAS EUCARIONTAS



INTRODUCCION:
Las células eucariotas poseen un núcleo definido con el material genético organizado en cromosomas. Todos los organismos multicelulares están formados por células eucariotas y también muchos organismos unicelulares y coloniales.

Material
- 1 microscopio optimo
- 5 portaobjetos
- 5 cubreobjetos
- 1 agitador
- 1 bisturí con navaja
- 1 vaso de presipitado
- 2 goteros
- 1 servilleta de papel
- 1 trozo de papel de seda
- 1 caja de petri

Sustancias
- Agua destilada
- Reactivos de Gram: cristal violeta, lugol, alcohol-cetona, safranina
- Sudan III
- Yogurt casero
- Agua de charco o de florero
- Cebolla, papa, plátano, manzana, papaya, aguacate, nuez, zanahoria, betabel
- Flores de gladiola roja
Procedimiento
Células bacterianas

Las bacterias son células muy pequeñas (1 a 2 micrómetros ) y pueden tener forma esferica ( cocos), de bastón basilos) o de espiral (espirilos).


1. Haz un frotis de una muestra de yogurt.


2. Realiza una tincion con Gram.


3. Colocale un portaobjetos y obsérvalo a inmersión.


4. Identifica la forma de la célula, la pared y el citoplasma.


5. Dibuja los esquemas en los cuadros para resultados.


Bacterias verde-azules (cianobacterias)

Las cianobacterias son organismo procariontes fotosinteticos. la clorofila que contiene esta dispersas en el citoplasma. Ademas de la clorofila, las cianofitas poseen pigmentos accesorios (carotenoides y ficobilinas).


1. Coloca sobre un portaobjeto una gota de agua de charco estancado y verde-azul.


2. Coloca un cubreobjetos y observa al microscopio con el objetivo seco fuerte.


3. Dibuja lo observado y señala las estructuras celulares identificadas.


Pared celular y núcleos en células de catafilia de cebolla

La cebolla es un tallo del cual nacen hojas modificadas llamadas catafilias, que no poseen clorofila y almacenan gran cantidad de carbohidratos.


1. Desprende con una pinza la epidermis interna de un trozo de catafilia de cebolla.


2. Coloca una pequeña porción de la película sobre un portaobjetos, añádele una gota de agua y una de lugol y acopla un cubreobjetos.


3. Observa con los objetivos de seco débil y seco fuerte.


4. Dibuja lo observado y señala las estructuras celulares identificadas.


Cloroplastos y pared celular en células de hoja de elodea

Las hojas de Elodea se pueden observar al MO sin ninguna preparación previa ya que están formadas por dos capas de células.


1. Coloca una hojita de elodea sobre un portaobjetos


2. Agregale una gota de agua y colocale el cubreobjetos.


3. Observar a seco débil y fuerte.


4. Dibuja las células t señala las estructuras identificadas.


Aminoplastos en tuberculos de papa.
Los aminoplastos son plastidiosque contienen el almidón presente en el tubérculo de la papa.


1. Corta un trozo de tubérculo de papa y raspa la superficie de corte con una hoja de afeitar o de bisturí.


2. Coloca el raspado en una gota de agua y raspa sobre un cubreobjetos


3. Agrega una gota de lugol.


4. Acopla un portaobjetos y observa con los objetivos seco debil y seco fuerte.


5. Localiza los aminoplastos teñidos de azul.


6. Dibuja las celulas t señala las estructuras identificadas.


Aminoplastos en platano.
Las celulas de platano tanbien poseen aminoplastos que almacenan almidon pero que se diferencias de los aminoplastos de la papa en su morfologia.


1. Raspa una pequeña cantidad de tejido de la superificie del fruto.


2. Dispersala sobre el portaobjetos.


3. Agrega una gota de lugol.


4. Coloca un cubreobjetos y observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.


5. Dibuja las células y señala los almidones identificados.


6. Compara la morfología de los amiloplastos de papa y de plátano.


7. Repite el procedimiento anterior con manzana y papaya. Compara la estructura de los amiloplastos.


Cromoplastos de zanahoria y betabel.
En la zanahoria y el betabel, así como en otra partes de distintas especires de plantas, se encuentran cromoplastos que contienen pigmentos amarillos, naranjas o rojos, llamdos carotenos.


1. Corta una delgada capa de tejido de la porcion mas extensa de la zanahoria.


2. Colócala sobre una gota de agua en el portaobjetos.


3. Acopla un cubreobjetos.


4. Observar con los objetivos seco debil y seco fuerte. Los cromosomas estan teñidos naturalmente.


5. Dibuja las células y señala los cromoplastos identificados.


6. Procede del mismo modo con el betabel.


Cromoplastos en flores coloridas.

Las flores coloridas de color entre azul y rojo contienen en los cromoplastos unos pigmentos llamados antocianinas.


1. Desprende la epidermis de los mas delgada posible de una flor colorida, puede ser gladiola.


2. Colocala sobre un portaobjetos con una gota de agua destilada y cubrela con el cubreobjetos.


3. Observa con los objetivos seco debil y seco fuerte.


4. Dibuja las celulas y señala los cromoplastos identificados.



Oleoplastos en celulas de aguacate o nuez


Son plastidos que almacenan aceites como reserva de compuestos energeticos.


1. Haz un raspado del aguacate (o macerado de la nuez y coloca una pequeña porcion sobre un cubreobjetos con una gota de agua.


2. Agrega una gota del colorante de sudan III


3. Observa con los objetivos seco debil y seco fuerte. Los oleoplastos se ven de color naranja.


4. Dibuja las celulas y señala los oleoplastos identificados.


Celulas animales


1. Con un portaobjetos y muy cuidadosamente haz un raspado de la cara interna del labio inferior.


2. Extiende la masilla que quedo en el borde del portaobjetos y mezcla con una gota de agua destilada.


3. Agrega una gota de safranina y coloca el cubreobjetos.


4. Observa con los objetivos seco debil y seco fuerte.


5. Dibuja las celulas y señala las partes identificadas.






CONCLUSION: NO LA HICE YO PERO CREO QUE ESTUVO MUY PADRE PODER IDENTIFICAR CIERTAS ESTRUCTURAS UNIFORMES DE LA CELULA.

sábado, 7 de marzo de 2015

PRUEBA INMUNOLOGICA DE EMBARAZO-MACADORES TUMORALES

TEST EMBARAZO (HORMONA GCH)
GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA (HCG).
La gonadotropina coriónica humana (hCG) es una hormona glicoproteica producida en el embarazo, fabricada por el embrión en desarrollo poco después de la concepción y más tarde por el sinciciotrofoblasto (parte de la placenta).
Fundamento.
Todas las pruebas de embarazo buscan detectar una hormona especial que sólo se encuentra en la orina o en la sangre cuando una mujer está embarazada.
La Gonadotropina Coriónica humana (hCG), también se la llama hormona del embarazo.
Técnicas de diagnóstico.
Éstas pruebas puedes realizarse mediante la orina o bien de sangre.
RECOLECCION  DE LA MUESTRA
. Se debe recolectar una muestra de orina en un recipiente limpio y seco. Es preferible recolectar la muestra de la primera orina de la mañana.
PROCEDIMIENTO  DE  LA  PRUEBA
. Antes de realizar la prueba permita que la muestra de orina se equilibre a temperatura ambiente (18-30°C).

1.-Abra el sobre y tome el cassette por el lado contrario al depósito de la muestra.

2.- Vacíe aproximadamente 4 gotas de la muestra de orina en el cuentagotas y distribúyala en el deposito del cassette.

3.- Espere de 1 - 5 minutos y lea los resultados. Los resultados positivos se pueden observar en 40 segundos. De cualquier manera, para confirmar los resultados negativos, se necesita esperar el tiempo completo de reacción, no lea los resultados después de 10 minutos
INTERPRETACION   DEL  RESULTADO.

POSITIVO
.
Aparecen dos líneas rojas distintivas. Una línea debe estar en la región de control (C) y la otra en la región de prueba (T).

NEGATIVO
.Aparece una línea roja en la región de prueba (T). No aparece línea roja o rosa definida en la región de (T).

POSITIVO DEBIL.
La línea roja en la región de prueba (T) se muestra desvanecida en comparación con la línea roja de la región de control (C). Esto significa que es necesario repetir la prueba de nuevo en 48 horas.

POSITIVO FUERTE.
La línea roja en la región de prueba (T) aparece muy brillante y la línea roja en la región de control (C) de la tira aparece muy desvanecida. Esto significa que el embarazo se está desarrollando al final del tercer trimestre

CONLUSION:

ESTA PRUEBA SE REALIZO CON EL FIN DE COMPROBAR LA EXISTENCIA DE HORMONA CORINICA HUMANA O DE EMBARAZO.



BIOMOLECULAS. BIOLOGÍA COMTEMPORANEA.

PRACTICA Nº.1

BIOMOLÉCULAS
OBJETIVO:

El alumno distinguirá en forma práctica que alimentos contienen carbohidratos y cuales proteínas y grasa.
INTRODUCCIÓN:

Entre los compuestos fundamentales de la materia viva de las células encontramos los carbohidratos, lípidos y proteínas; por esta razón, los alimentos que consumen todos los heterótrofos, incluido el ser humano, deben contener necesariamente estas macromoléculas.
Mediante el uso de pruebas químicas sencillas se puede identificar en los alimentos la presencia de estas macromoléculas.

MATERIAL:

1.       10 tubos de ensaye.
2.      1  gradilla.
3.      2 vasos de precipitado de 100 ml.
4.      1 agitador.
5.      1 mechero  Bunsen.
6.      2 pinzas para tubo de ensaye.
7.      1 gotero.
8.     1 pliego de papel estraza.

SUSTANCIAS:

PARA CARBOHIDRATOS:
1.       Reactivo de Fehling.
2.      Ácido clorhídrico al 50%.
3.      Lugol (solución alcohólica de yodo).

PARA PROTEÍNAS:
1.       Reactivo de Biuret.
2.      Ácido nítrico concentrado.
3.      Hidróxido de amonio concentrado.

PARA LÍPIDOS:
1.       Sudan III

MUESTRA DE ALIMENTOS:
Harinas (trigo).
Frutas (manzana).
Verduras (zanahoria).
Carnes (hígado de pollo).
Lácteos (queso).
Semillas (haba).
De preferencia que los alimentos estén hervidos, a excepción de las frutas.
Trabajaras con cantidades suficientes para que alcances a observar las reacciones, pero que no ponga en riesgo su integridad física.

PROCEDIMIENTO:

REACCIONES PARA IDENTIFICAR CARBOHIDRATOS:
1.- Prueba de Lugol (se utiliza para identificar almidones)
a)     Coloca una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo.
b)     Agregar dos gotas de Lugol.
c)      Observa el color que toma la muestra al reaccionar con el Lugol.
d)     Repite la muestra por lo menos en 5 muestras diferentes.
e)     Anote los resultados en la tabla de registro.
Si la muestra contiene almidón, con el Lugol adquirirá una coloración azul obscuro (prueba positiva); si no, tomará el color ámbar del reactivo (prueba negativa).

2.- Prueba de Fehling (se utiliza para identificar azucares reductores)
a)     Agrega 0.5ml de solución de Fehling A y 0.5ml de Fehling B a una pequeña porción de muestra colocada en el tubo de ensaye.
b)     Agregar 2ml de agua si la muestra es sólida.
c)      Calienta a ebullición por 2 minutos, cuidando que la muestra no se proyecte. El calentamiento puede realizarse en baño maría, y la boca de los tubos debe estar dirigida donde no haya personas.
d)     Observa el color de la reacción y anota los resultados en el cuadro.
e)     Repite la prueba con por lo menos 5 alimentos diferentes. Puedes preparar todos los tubos y meterlos juntos al baño maría.
Si la muestra contiene azucares reductores, al reaccionar con el reactivo de Fehling se formara precipitado café rojizo (prueba positiva); si no, la muestra queda de color azul del reactivo (prueba negativa).
Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor plástico para su tratamiento o almacenamiento temporal, hasta que pueda desecharse correctamente.

REACCIONES PARA IDENTIFICAR PROTEÍNAS:
1.- Prueba de Biuret (se utiliza para identificar proteínas y poli péptidos, no  menores de tres aminoácidos, en solución o al estado sólido)
a)     Agregar 1ml de reactivo de Biuret a una pequeña porción de muestra colocada en cada tubo de ensaye.
b)     Observa la coloración que toma la muestra.
c)      Anota los resultados en el cuadro
d)     Repite la muestra por lo menos en 5 muestras diferentes.
Si en la muestra hay proteínas se observara  que la muestra toma una coloración violeta o morada (prueba positiva); si se queda  de color azul, quiere decir que en la muestra no hay proteínas (prueba negativa).
Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor plástico para su tratamiento o almacenamiento temporal, hasta que pueda desecharse correctamente.

2.- Reacción xantoproteica (se utiliza para identificar proteínas que contienen aminoácidos aromáticos)
a)     Agrega 1ml de ácido nítrico a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye, calienta con precaución, sujetando el tubo con unas pinzas para tubo de ensaye y metiendo y sacando el tubo de la flama para evitar que se proyecte la solución, y dirigiendo la boca del tubo hacia donde no haya personas. Espera que enfrié.
b)     Deja resbalar por las paredes del tubo 1ml de hidróxido de amonio (no respires los vapores) si agitar, de tal forma que se formen dos capas.
c)      Anota los resultados en el cuadro.
d)     Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
Si en la muestra hay proteínas, se formara un anillo de color naranja entre las capas formadas por el ácido y el hidróxido (prueba positiva).
Los residuos contienen un ácido y una base, por lo que mezcla con mucho cuidado las  dos capas para que ambas soluciones (ácido y base) se neutralicen y se puedan desechar.

REACCIONES PARA IDENTIFICAR LIPIDOS:
1.- Reacción con Sudán III (se basa en que este colorante es soluble en grasas e insoluble en agua)
a)     Coloca en los tubos pequeñas porciones de muestras.
b)     Agregar a cada tubo 5ml de agua de grifo.
c)      Agrega 3 gotas del reactivo Sudán III
d)     Agita enérgicamente y deja reposar por 5 minutos.
e)     Observa la formación de gotas de grasa coloreadas con Sudán III de color naranja, lo cual indica que el alimento contiene grasas (prueba positiva).
f)       Anota los resultados en el cuadro.
g)     Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
Manteniendo las condiciones  adecuadas de manejo no  cabe esperar problemas ecológicos, por lo que las sustancias pueden desecharse  por el desagüe.

2.- Prueba con papel estraza
·         Coloca las pequeñas porciones de cada alimento en pedazos de papel estraza.
·         Dobla el papel sobre el alimento y presiona con los dedos.
·         Observa si hay áreas del papel que se vean translucidas y aparentemente húmedas, lo cual indica  que el alimento contiene grasas (prueba positiva).
·         Anota los resultados en el cuadro.
·         Repite la prueba con por lo menos 5 alimentos diferentes.

RESULTADOS:

1)      Para anotar los resultados obtenidos en cada una de las pruebas, se escribe +++ cuando el resultado de la prueba sea muy positivo (el color sea bien definido, lo cual indica alta concentración de la biomolécula buscada). ++ cuando el resultado de la prueba sea regularmente positivo. + para poco positivo y – para negativo (cuando no del color esperado, lo indicara ausencia de biomolécula).

ALIMENTO

CARBOHIDRATOS
PROTEINAS
LIPIDOS

LUGOL
FEHLIG
BIURET
XANTO-PROTEICA
SUDAN III
ESTRAZA
1
HIGADO
-
No
+
+
+
+
2
ZANAHORIA
++
No
+
-
+
+
3
QUESO
+++
No
+
++
+
+
4
HABA
+
No
-
++
-
+
5
MANZANA
+
No
+
++
-
+
6
TRIGO
++
No
+
+
+
+

NOTA:LA PRUEBA DE__Fehlig____ NO FUE REALIZADA
2)     Tomando en cuenta los resultados obtenidos clasifica los alimentos en energéticos y proteicos.

CONCLUSIÓN:
Esta prueba se realizó para comprobar la existencia de sustancias (biomoléculas) en alimentos de origen animal y vegetal y la diferencia de estas en cada uno de ellos.  


Vo.Bo. DEL PROFESOR



DR.VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO

EVIENCIAS FOTOGRAFICAS